TLC Stains | TLC 显色剂总结

通用显色剂

显色剂 配制方法 适用物质 显色
紫外灯 (UV 254/360 nm) — 具有荧光特性的化合物 紫色点
高锰酸钾 (KMnO₄) KMnO₄ 1.5 g + K₂CO₃ 10 g + 水 200 mL + 10% NaOH 1.25 mL 对氧化敏感的化合物 温和加热 → 黄色点
碘 (I₂) 广口瓶 + 滤纸 + 少量碘晶体 不饱和化合物、芳香族化合物 黄褐色点
钼酸铈 (Hanessian’s Stain) 钼酸铵 12 g + 水 235 mL + 钼酸铈铵 0.5 g + 浓硫酸 15 mL 广谱、高灵敏 加热后浅蓝背景 + 深蓝点
磷钼酸 (PMA) 磷钼酸 10 g + 乙醇 100 mL 广谱、高灵敏 120 °C 加热 2–3 min → 蓝绿色斑点
硫酸铈 (Ce(SO₄)₂) 10% 硫酸铈 + 15% 硫酸水溶液 广谱（对生物碱更有效） 棕色点
香豆醛 (Vanillin) 香豆醛 15 g + 乙醇 250 mL + 浓硫酸 2.5 mL 广谱 120 °C 加热 3–5 min → 多色点
茴香醛 (p-Anisaldehyde) 乙醇 135 mL + 浓硫酸 5 mL + 乙酸 1.5 mL + 茴香醛 3.7 g 对亲核性官能团敏感；对不饱和键不敏感 温和加热 → 淡粉背景 + 多色点

特异性显色剂

显色剂 配制方法 适用物质 显色
氯化铁 (FeCl₃) 1% FeCl₃ + 50% 甲醇水溶液 酚类 多种颜色
茚三酮 (Ninhydrin) 茚三酮 1.5 g + 正丁醇 100 mL + 乙酸 3 mL 氨基酸、胺类 110 °C 加热 → 红色点
二硝基苯肼 (DNP) DNP 12 g + 水 80 mL + 浓硫酸 60 mL + 乙醇 200 mL 醛、酮 黄色 → 红色
溴甲酚绿 (Bromocresol Green) 40 mg 溴甲酚绿 + 乙醇 100 mL + NaOH 至蓝色 pKₐ < 5 的化合物（如羧酸） 蓝色背景 + 黄色点
氯化钯 (PdCl₂) PdCl₂ 500 mg + 浓盐酸 2.5 mL + 乙醇 100 mL 含磷/硫配位化合物 黄色 → 黑色
姜黄素 (Curcumin) 姜黄素 100 mg + 乙醇 99 mL + 2 M HCl 含硼化合物 红色点

操作要点

  • 显色方法：喷洒 (spray) 在 TLC 板上 + 加热，而非浸泡。
  • 最常用通用显色剂：PMA、p-anisaldehyde、vanillin。
  • 酚类 → FeCl₃；胺类 → Ninhydrin；醛酮 → DNP。

General Stains

Stain Preparation Target Visualization
UV Lamp (254/360 nm) — UV-active compounds Purple spots
KMnO₄ KMnO₄ 1.5 g + K₂CO₃ 10 g + H₂O 200 mL + 10% NaOH 1.25 mL Oxidation-sensitive compounds Gentle heating → yellow spots
I₂ Jar + filter paper + few iodine crystals Unsaturated/aromatic compounds Yellow-brown spots
Hanessian’s Stain (NH₄)₆Mo₇O₂₄ 12 g + H₂O 235 mL + (NH₄)₂Ce(NO₃)₆ 0.5 g + conc. H₂SO₄ 15 mL Broad spectrum, high sensitivity Heat → light blue background + dark blue spots
PMA Phosphomolybdic acid 10 g + EtOH 100 mL Broad spectrum, high sensitivity 120 °C, 2–3 min → blue-green spots
Ce(SO₄)₂ 10% Ce(SO₄)₂ in 15% H₂SO₄ (aq) Broad spectrum (especially alkaloids) Brown spots
Vanillin Vanillin 15 g + EtOH 250 mL + conc. H₂SO₄ 2.5 mL Broad spectrum 120 °C, 3–5 min → multicolored spots
p-Anisaldehyde EtOH 135 mL + conc. H₂SO₄ 5 mL + AcOH 1.5 mL + p-anisaldehyde 3.7 g Nucleophilic functional groups; insensitive to unsaturation Gentle heating → pale pink background + multicolored spots

Specific Stains

Stain Preparation Target Visualization
FeCl₃ 1% FeCl₃ in 50% MeOH/H₂O Phenols Various colors
Ninhydrin Ninhydrin 1.5 g + n-BuOH 100 mL + AcOH 3 mL Amino acids, amines 110 °C → red spots
DNP 2,4-DNP 12 g + H₂O 80 mL + conc. H₂SO₄ 60 mL + EtOH 200 mL Aldehydes, ketones Yellow → red
Bromocresol Green 40 mg bromocresol green + EtOH 100 mL + NaOH until blue pKₐ < 5 compounds (e.g., carboxylic acids) Blue background + yellow spots
PdCl₂ PdCl₂ 500 mg + conc. HCl 2.5 mL + EtOH 100 mL P/S-containing coordinating compounds Yellow → black
Curcumin Curcumin 100 mg + EtOH 99 mL + 2 M HCl Boron-containing compounds Red spots

Practical Notes

  • Application: spray onto TLC plate + heat; do not dip.
  • Most common general stains: PMA, p-anisaldehyde, vanillin.
  • Phenols → FeCl₃; Amines → Ninhydrin; Aldehydes/ketones → DNP.
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Last updated on May 26, 2026